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Procedimiento

1. Elija el medio de cultivo que va a preparar. Lea  muy  bien  la etiqueta del  medio  de  cultivo y  saque los cálculos de la cantidad de medio de cultivo que usted necesita teniendo  en  cuenta  el numero  de cajas de  petry que  usted necesita. Recuerde que  a  cada caja (con  diámetro  de  10 mmdebe  echarle  aproximadamente  entre 20-25 CC de  medio  de  cultivo, para  que   queden   de  4 mm de  diámetro, que  es  el  grosor   ideal  para  que  la  caja  no  se  deshidrate tan  rápidamente.

2. Una vez sacados los cálculos pese la cantidad de medios de cultivo y  mida  el  agua  destilada, y proceda a pesar  el  medio de  cultivo y  añádaselo  al  agua  destilada

3. caliente en la estufa, agitando constantemente  para disolver el agar y evitar que este se pegue  en el fondo del erlenmeyer. *El agar está completamente disuelto cuando no se observan gránulos o  grumos adheridos a las superficies del erlenmeyer: esto  se  da, cuando  el  agar  empieza  a hervir.*

4. Tape el erlenmeyer y proceda a esterilizar en  autoclave por  15 minutos (121º C  y  15  libras  de  presión):  si  usted  preparo  tubos  de  ensayo estos se  llenan se  tapan y se  esterilizan  en  el  autoclave, pero  si  son cajas  de  petry,  primero  se  esteriliza  el  erlenmeyer  con  el medio  de  cultivo.

5. cuando termine  el  proceso  de  esterilización, saque  los  erlenmeyer  del  autoclave  deje  enfriar   a una  temperatura  aproximada  de  50º C y  proceda  a  llenar  las  cajas  de petry: recuerde  que  el  área  de  embasado debe  estar  desinfectada,  con  mecheros  prendidos  y  usted  debe  usar todas  las  normas  de bioseguridad, esto  para  no  contaminar  los  medios  de  cultivo estériles.

6. Cuando  los  medios  estén  fríos y  solidificados,   guarde  las  cajas en la nevera  hasta  su  uso siempre  con  la  tapa  boca  abajo y  ojala  en  bolsas  plásticas  para  evitar  la  deshidratación  de  los  mismos. Recuerde  que  siempre debe  hacer  *control  de  esterilidad  a  los  medios   preparados*. Para esto  se  introduce  un  5%  del  lote  preparado  en la incubadora a  35º c por  un  lapso  de  18-24 horas.